病毒包装-慢病毒

在程序上，慢病毒载体和逆转录病毒载体之间的一个重要区别是:对于慢病毒载体，包装、包膜和转运质粒通常被转染到包装细胞系中，而对于逆转录病毒载体，只有转运载体被转染到细胞系中，并且细胞系已经稳定表达了另外两种载体。

包膜蛋白

病毒载体可以在其他病原体外壳蛋白的帮助下包装成假病毒，以改变它们的嗜性。最常用的是疱疹性口炎病毒膜融合包膜G糖蛋白(VSV-G)。其他常见的包膜蛋白来源于狂犬病病毒、鼠白血病病毒、埃博拉病毒、杆状病毒、麻疹病毒和丝状病毒。杆状病毒GP64和肝炎E1和E2假病毒增强肝转导，而丝状病毒包膜假病毒增强呼吸上皮细胞或内皮细胞的转导。有趣的是，假病毒还可以影响包被狂犬病毒糖蛋白的慢病毒的转运，导致轴突逆行转运[12]。

注:由于γ-逆转录病毒和慢病毒的gag、pol和env基因的亚型差异，转运质粒和包装质粒不能互换。

该系统增加了两个元件，即来源于HIV1整合酶基因的转录后调控元件(土拨鼠肝炎病毒转录后元件，WPRE)和中央多聚嘌呤束(cPPT)，WPRE有利于增加蛋白表达，cPPT元件有利于增加病毒滴度，WPRE和cPPT元件可以增加蛋白表达至少4倍。

聚丁二烯是一种带正电荷的小分子，与细胞表面的阴离子结合，提高慢病毒对细胞的感染效率。通常加入聚凝胺可以提高感染效率2-10倍。凝聚胺具有一定程度的精细毒性，部分细胞对凝聚胺有明显的毒性反应，因此有必要探讨细胞感染时是否适用凝聚胺。不同细胞对凝聚胺的敏感性不同。在1-10ug/ml范围内可筛选出适宜的浓度，24小时内武鸣县细胞毒性反应最好。可以参考文献，做初步实验。凝聚胺最常用的工作浓度为6-8ug/ml。